生物發(fā)光成像是生物醫(yī)藥領(lǐng)域在二維/三維乃至四維尺度內(nèi)研究組織、細胞和亞細胞成分的強有力方法，也是活體動物進行無創(chuàng)、實時追蹤細菌和腫瘤檢測的最佳選擇。有研究采用大腸桿菌 Nissle 1917 (Escherichia coli Nissle 1917，EcN)為底盤細胞，實現(xiàn)了單次注射對腫瘤長達 12 天的精準成像。EcN 作為大腸桿菌種唯一一株益生菌，鑒于其長期而安全的人類給藥記錄和腫瘤特異性定植特性與原位激活多種前體藥物特性，EcN已成為合成生物學(xué)應(yīng)用中首選“底盤”之一，用于工程治療細菌對抗感染、代謝疾病、胃腸道炎癥性疾病和癌癥。
EcN作為益生菌菌株可以選擇性在腫瘤位置富集，多項研究將其作為抗癌藥物或治療基因的載體或平臺。泓迅生物參考多篇Nature文獻綜合篩選出幾種不同顏色的代表熒光蛋白（Fluorescent Proteins, FP），以質(zhì)?；蚧蚪M整合的方式，將EcN改造為自發(fā)表達FPs的熒光菌株。多樣的改造菌株覆蓋了從藍色到紅色的光譜區(qū)域，極大滿足了科研人員對于定位、原位成像和追蹤等方面不同的需求。
| 熒光蛋白 | 熒光顏色 | 最大激發(fā)波長（nm） | 最大發(fā)射波長（nm） | 亮度 |
|---|---|---|---|---|
| miRFP713 | Near-infrared | 690 | 713 | 6.3 |
| mTagBFP2 | Blue | 399 | 454 | 36.48 |
| mTurquoise2 | Cyan | 434 | 474 | 28.52 |
| mCitrine | Yellow | 516 | 529 | 88.80 |
| mOrange2 | Orange | 549 | 565 | 40.88 |
| mCherry | Red | 587 | 610 | 25.50 |
| EGFP | Green | 448 | 507 | 45.88 |
注：不同類型的FPs具有不同的應(yīng)用場景：EGFP、mCherry等適合細菌單獨成像，或者細菌互作細胞或者細菌感染動物模型淺層組織成像等；iRFP近紅外熒光蛋白，適合細菌干擾動物模型，深層組織器官活體成像等。
| Fluorescent proteins | Host Strains | Types | Promoter |
|---|---|---|---|
| miRFP713 | EcN | Plasmids;Genome Intergration | Inducible promoter TAC；Constitutive promoter EM7 |
| mTagBFP2 | EcN | Plasmids;Genome Intergration | Inducible promoter TAC；Constitutive promoter EM7 |
| mTurquoise2 | EcN | Plasmids;Genome Intergration | Inducible promoter TAC；Constitutive promoter EM7 |
| mCitrine | EcN | Plasmids;Genome Intergration | Inducible promoter TAC；Constitutive promoter EM7 |
| mOrange2 | EcN | Plasmids;Genome Intergration | Inducible promoter TAC；Constitutive promoter EM7 |
| mCherry | EcN | Plasmids;Genome Intergration | Inducible promoter TAC；Constitutive promoter EM7 |
| EGFP | EcN | Plasmids;Genome Intergration | Inducible promoter TAC；Constitutive promoter EM7 |
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